Evaluation of an amino acid residue critical for the specificity and activity of human Gb3/CD77 synthase
PBN-AR
Instytucja
Instytut Immunologii i Terapii Doświadczalnej im. Ludwika Hirszfelda Polskiej Akademii Nauk
Informacje podstawowe
Główny język publikacji
angielski
Czasopismo
Glycoconjugate Journal
ISSN
0282-0080
EISSN
1573-4986
Wydawca
SPRINGER
DOI
URL
Rok publikacji
2016
Numer zeszytu
6
Strony od-do
963-973
Numer tomu
33
Identyfikator DOI
Liczba arkuszy
Autorzy przekładu
(liczba autorów przekładu: 0)
Słowa kluczowe
angielski
Gb3/CD77 synthase
Glycopshingolipids
NOR polyagglutination
P1PK blood group system
Site-directed mutagenesis
Open access
Tryb otwartego dostępu
Inne
Wersja tekstu w otwartym dostępie
Wersja opublikowana
Licencja otwartego dostępu
Creative Commons — Uznanie autorstwa
Czas opublikowania w otwartym dostępie
Razem z publikacją
Streszczenia
Język
angielski
Treść
Human Gb3/CD77 synthase (α1,4-galactosyltransferase) is the only known glycosyltransferase that changes acceptor specificity because of a point mutation. The enzyme, encoded by A4GALT locus, is responsible for biosynthesis of Gal(α1–4)Gal moiety in Gb3 (CD77, Pk antigen) and P1 glycosphingolipids. We showed before that a single nucleotide substitution c.631C > G in the open reading frame of A4GALT, resulting in replacement of glutamine with glutamic acid at position 211 (substitution p. Q211E), broadens the enzyme acceptor specificity, so it can not only attach galactose to another galactose but also to N-acetylgalactosamine. The latter reaction leads to synthesis of NOR antigens, which are glycosphingolipids with terminal Gal(α1–4)GalNAc sequence, never before described in mammals. Because of the apparent importance of position 211 for enzyme activity, we stably transfected the 2102Ep cells with vectors encoding Gb3/CD77 synthase with glutamine substituted by aspartic acid or asparagine, and evaluated the cells by quantitative flow cytometry, high-performance thin-layer chromatography and real-time PCR. We found that cells transfected with vectors encoding Gb3/CD77 synthase with substitutions p. Q211D or p. Q211N did not express Pk, P1 and NOR antigens, suggesting complete loss of enzymatic activity. Thus, amino acid residue at position 211 of Gb3/CD77 synthase is critical for specificity and activity of the enzyme involved in formation of Pk, P1 and NOR antigens. Altogether, this approach affords a new insight into the mechanism of action of the human Gb3/CD77 synthase.
Cechy publikacji
artykuł oryginalny
Inne
System-identifier
PX-5882103f82ce8c9a4e3dc4df
CrossrefMetadata from Crossref logo
Cytowania
Liczba prac cytujących tę pracę
Brak danych
Referencje
Liczba prac cytowanych przez tę pracę
Brak danych