Characterization of mAb6-9-1 monoclonal antibody against hemagglutinin of avian influenza virus H5N1 and its engineered derivative, single-chain variable fragment antibody.
PBN-AR
Instytucja
Interdyscyplinarne Centrum Modelowania Matematycznego i Komputerowego (Uniwersytet Warszawski)
Informacje podstawowe
Główny język publikacji
en
Czasopismo
Acta Biochimica Polonica
ISSN
0001-527X
EISSN
1734-154X
Wydawca
Polskie Towarzystwo Biochemiczne i Komitet Biochemii i Biofizyki PAN
DOI
Rok publikacji
2016
Numer zeszytu
1
Strony od-do
85-92
Numer tomu
64
Identyfikator DOI
Liczba arkuszy
Open access
Tryb otwartego dostępu
Otwarte czasopismo
Wersja tekstu w otwartym dostępie
Wersja opublikowana
Licencja otwartego dostępu
Inna
Czas opublikowania w otwartym dostępie
Przed publikacją
Data udostępnienia w sposób otwarty
Streszczenia
Język
en
Treść
Hemagglutinin (HA), as a major surface antigen of influenza virus, is widely used as a target for production of neutralizing antibodies. Monoclonal antibody, mAb6-9-1, directed against HA of highly pathogenic avian influenza virus A/swan/Poland/305-135V08/2006(H5N1) was purified from mouse hybridoma cells culture and characterized. The antigenic specificity of mAb6-9-1 was verified by testing its cross-reactivity with several variants of HA. The mimotopes recognized by mAb6-9-1 were selected from two types of phage display peptide libraries. The comparative structural model of the HA variant used for antibody generation was developed to further facilitate epitope mapping. Based on the sequences of the affinity- selected polypeptides and the structural model of HA the epitope was located to the region near the receptor binding site (RBS). Such localization of the epitope recognized by mAb6-9-1 is in concordance with its moderate hemagglutination inhibiting activity and its antigenic specificity. Additionally, total RNA isolated from the hybridoma cell line secreting mAb6-9-1 was used for obtaining two variants of cDNA encoding recombinant single-chain variable fragment (scFv) antibody. To ensure high production level and solubility in bacterial expression system, the scFv fragments were produced as chimeric proteins in fusion with thioredoxin or displayed on a phage surface after cloning into the phagemid vector. Specificity and affinity of the recombinant soluble and phage-bound scFv were assayed by suitable variants of ELISA test. The observed differences in specificity were discussed.
Cechy publikacji
Biochemia – dziedzina nauk chemicznych
Biotechnologia – dziedzina nauk chemicznych
Biochemia – dziedzina nauk biologicznych
Biofizyka – dziedzina nauk biologicznych
Biologia
Biotechnologia – dziedzina nauk biologicznych
Mikrobiologia
Biocybernetyka i inżynieria biomedyczna
Biotechnologia – dziedzina nauk rolniczych
Biologia medyczna
Medycyna
Nauki farmaceutyczne
Biochemistry – field of chemical sciences
Biotechnology – field of chemical sciences
Biochemistry – field of biological sciences
Biophysics – field of biological sciences
Biology
Biotechnology – field of biological sciences
Microbiology
Biocybernetics and biomedical engineering
Biotechnology – field of agricultural sciences
Medical biology
Medicine
Pharmacy
Original article
Original article presents the results of original research or experiment.
Oryginalny artykuł naukowy
Oryginalny artykuł naukowy przedstawia rezultaty oryginalnych badań naukowych lub eksperymentu.
Inne
System-identifier
PBN-R:785770
CrossrefMetadata from Crossref logo
Cytowania
Liczba prac cytujących tę pracę
Brak danych
Referencje
Liczba prac cytowanych przez tę pracę
Brak danych