Characterization of mAb6-9-1 monoclonal antibody against hemagglutinin of avian influenza virus H5N1 and its engineered derivative, single-chain variable fragment antibody.
PBN-AR
Instytucja
Sieć Badawcza Łukasiewicz - Instytut Biotechnologii i Antybiotyków
Informacje podstawowe
Główny język publikacji
en
Czasopismo
Acta Biochimica Polonica (15pkt w roku publikacji)
ISSN
0001-527X
EISSN
1734-154X
Wydawca
Polskie Towarzystwo Biochemiczne i Komitet Biochemii i Biofizyki PAN
DOI
Rok publikacji
2017
Numer zeszytu
1
Strony od-do
85-92
Numer tomu
64
Identyfikator DOI
Liczba arkuszy
Autorzy
(liczba autorów: 9)
Pozostali autorzy
+ 7
Autorzy przekładu
(liczba autorów przekładu: 0)
Słowa kluczowe
angielski
influenza virus,
monoclonal antibody,
scFv,
hemagglutinin,
antigenic epitope
Open access
Tryb otwartego dostępu
Otwarte czasopismo
Wersja tekstu w otwartym dostępie
Wersja opublikowana
Licencja otwartego dostępu
Creative Commons — Uznanie autorstwa
Czas opublikowania w otwartym dostępie
Przed publikacją
Streszczenia
Język
en
Treść
Hemagglutinin (HA), as a major surface antigen of influenza virus, is widely used as a target for production of neutralizing antibodies. Monoclonal antibody, mAb6-9-1, directed against HA of highly pathogenic avian influenza virus A/swan/Poland/305-135V08/2006(H5N1) was purified from mouse hybridoma cells culture and characterized. The antigenic specificity of mAb6-9-1 was verified by testing its cross-reactivity with several variants of HA. The mimotopes recognized by mAb6-9-1 were selected from two types of phage display peptide libraries. The comparative structural model of the HA variant used for antibody generation was developed to further facilitate epitope mapping. Based on the sequences of the affinity-selected polypeptides and the structural model of HA the epitope was located to the region near the receptor binding site (RBS). Such localization of the epitope recognized by mAb6-9-1 is in concordance with its moderate hemagglutination inhibiting activity and its antigenic specificity. Additionally, total RNA isolated from the hybridomacell line secreting mAb6-9-1 was used for obtaining two variants of cDNA encoding recombinant single-chain variable fragment (scFv) antibody. To ensure high production level and solubility in bacterial expression system, the scFv fragments were produced as chimericproteins in fusion with thioredoxin or displayed on a phage surface after cloning into the phagemid vector. Specificity and affinity of the recombinant soluble and phage-bound scFv were assayed by suitable variants of ELISA test. The observed differences in specificity were discussed.
Inne
System-identifier
PX-599583e3d5dee5122bcfb486
CrossrefMetadata from Crossref logo
Cytowania
Liczba prac cytujących tę pracę
Brak danych
Referencje
Liczba prac cytowanych przez tę pracę
Brak danych